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豬繁殖與呼吸綜合征區(qū)域流行病學(xué)調(diào)查

發(fā)布時(shí)間：

2018-08-31

　　豬繁殖與呼吸綜合征（PRRS）是由豬繁殖與呼吸綜合征病毒（PRRSV）引起的急性、高度接觸性傳染病。單股RNA病毒，屬于動(dòng)脈炎病毒科，動(dòng)脈炎病毒屬成員，分歐洲型和美洲型，我國(guó)流行的主要是美洲型。PRRS在20世紀(jì)80年代首發(fā)于美國(guó)，現(xiàn)已遍布世界主要養(yǎng)豬國(guó)家。我國(guó)1996年首次分離到病毒，證實(shí)有PRRS存在，隨后在不同地區(qū)迅速傳播、變異，2006年突然暴發(fā)嚴(yán)重的無(wú)名高熱病，經(jīng)研究證實(shí)主要是由PRRSV的變異株HP PRRSV引起。
　　PRRS主要臨床癥狀是妊娠母豬流產(chǎn)、死胎、木乃伊胎等繁殖障礙，各年齡段仔豬的呼吸道癥狀，以及哺乳仔豬的高死亡率，PRRS常與豬圓環(huán)病毒2型（PCV-2）等病原混合感染使病情復(fù)雜化，20世紀(jì)90年代以來(lái)PRRS感染呈上升趨勢(shì)，已嚴(yán)重威脅養(yǎng)豬業(yè)發(fā)展。
　　目前國(guó)內(nèi)PRRS防控以疫苗免疫為主，大慶市近些年P(guān)RRS疫苗免疫密度幾乎達(dá)到100%，血清流行病學(xué)調(diào)查已不可能。為了解大慶市豬群PRRS感染情況，2017年，項(xiàng)目組在大慶市及周邊地區(qū)共采集疑似病豬場(chǎng)和屠宰場(chǎng)組織樣本251套，進(jìn)行核酸調(diào)查，為區(qū)域防控措施的制定提供依據(jù)，為實(shí)驗(yàn)室進(jìn)一步研究提供原始材料。
　　1  材料和方法
　　1.1 材料
　　待檢樣本采自7個(gè)疑似斷奶仔豬多系統(tǒng)衰竭綜合征發(fā)病豬場(chǎng)病死豬組織樣本11套（肝、脾、肺、扁桃體和淋巴結(jié)等），7家屠宰場(chǎng)組織樣本240套。
　　1.2 方法
　　1.2.1 合成引物
　　根據(jù)GB/T18090-2008豬繁殖與呼吸綜合征診斷方法合成引物。
　　上游引物P1：5'-GCGGATCCATGCCAAATAACAAC-3',下游引物P2：5'-AGCTCGAGTCATGCTGAGGGTGA-3'。
　　1.2.2 操作過(guò)程
　　根據(jù)GB/T 18090-2008方法處理樣品提取RNA模板，反轉(zhuǎn)錄，PCR擴(kuò)增。反應(yīng)條件為：95℃、5min，95℃、1min，51℃、1min，72℃、1min，35個(gè)循環(huán)，72℃、延伸10min。被檢樣品出現(xiàn)372bp擴(kuò)增帶判為陽(yáng)性。
　　2  檢測(cè)結(jié)果
　　2.1 總體檢測(cè)結(jié)果
　　本次共采集樣品251套，其中7個(gè)疑似豬場(chǎng)11套，7家屠宰場(chǎng)組織樣本240套，經(jīng)基因擴(kuò)增檢測(cè)，陽(yáng)性組織樣本10套，平均陽(yáng)性率3.98%，陽(yáng)性次數(shù)5次，次平均陽(yáng)性率23.81%。詳見(jiàn)表1。
　　PRRS感染呈世界分布，近年來(lái)各種專(zhuān)業(yè)文獻(xiàn)報(bào)道顯示，我國(guó)豬群感染已較為普遍，本次調(diào)查，大慶市及周邊地區(qū)疑似病例樣品陽(yáng)性批次為42.86%，樣品陽(yáng)性率為45.45%，顯示大慶市及周邊地區(qū)豬群在疫病感染死亡病例中，由PRRS為主引起的病例較多，已接近一半。屠宰場(chǎng)樣品陽(yáng)性批次為14.29%，樣品陽(yáng)性率為2.08%，顯示有部分成年豬隱性帶毒。
　　2.2 不同地區(qū)樣品檢測(cè)結(jié)果
　　本次組織樣品按區(qū)域劃分為8個(gè)地區(qū)，經(jīng)統(tǒng)計(jì)，各地區(qū)差異較大，有4個(gè)地區(qū)未檢出，但檢出地區(qū)批次陽(yáng)性率較高；地區(qū)樣品陽(yáng)性率同樣差別較大，詳見(jiàn)表2。
　　由表2可知，大慶市及周邊地區(qū)PRRS感染率不高，有些地區(qū)并未檢出陽(yáng)性樣品，批次陽(yáng)性率較高的地區(qū)有ZB和HG等，陽(yáng)性率在50.00%左右，平均陽(yáng)性率只有23.81%；樣品陽(yáng)性率較高的地區(qū)只有ZB，其他地區(qū)較低，平均陽(yáng)性率只有3.98%。
　　3   討論
　　豬繁殖與呼吸綜合征是目前危害我國(guó)養(yǎng)豬業(yè)發(fā)展的重要疫病之一，常與豬圓環(huán)病毒的病原混合或繼發(fā)感染，加重病情。目前我國(guó)各地主要生豬產(chǎn)區(qū)深受豬繁殖與呼吸綜合征影響。本次調(diào)查，對(duì)采自大慶市及周邊地區(qū)7個(gè)疑似豬場(chǎng)的11套樣品和7家屠宰場(chǎng)的240套樣品，進(jìn)行了分子生物學(xué)（RT-PCR）檢測(cè)。結(jié)果顯示，PRRS陽(yáng)性批次只有23.81%（5/21），樣品平均陽(yáng)性率更少，僅為3.98%（10/251），與國(guó)內(nèi)其他地區(qū)報(bào)道和以往認(rèn)知不符，明顯偏低，這與樣品來(lái)源有關(guān)，本次樣品主要來(lái)源屠宰場(chǎng)。
　　目前我國(guó)豬繁殖與呼吸綜合征防控是以疫苗免疫為主，前些年實(shí)行強(qiáng)制免疫，大慶市及周邊地區(qū)應(yīng)用的是滅活疫苗，特別是大慶市，根據(jù)免疫抗體檢測(cè)效果，連續(xù)免疫，很好地控制了疫情。本次流行病學(xué)調(diào)查健康帶毒陽(yáng)性豬群不高，與疫苗連續(xù)應(yīng)用有直接關(guān)系，也說(shuō)明現(xiàn)階段，疫苗應(yīng)用的重要性。由于豬繁殖與呼吸綜合征是免疫抑制性疫病，在豬群繁殖與呼吸綜合征防控工作中，建立綜合性防控措施，控制混合感染和繼發(fā)感染，降低豬群潛在危害，有重要的指導(dǎo)意義。